如何对多年生木本植物进行组织培养

电脑作者 / 骚皮 / 2026-06-17 07:05
"
1 材料的选择和处理取健壮枝条的顶芽或侧芽,剪除叶片,用无菌水擦洗干净,在无菌条件下,用0.1%的升汞溶液浸泡消毒10min,无菌

1 材料的选择和处理

取健壮枝条的顶芽或侧芽,剪除叶片,用无菌水擦洗干净,在无菌条件下,用0.1%的升汞溶液浸泡消毒10min,无菌水冲洗3~4次,将处理过的组织放入组培培养室中开始培养。

2 接种

在无菌条件下,将顶芽或侧芽切成3~5mm长的段,剥去茎尖外部鳞片和小叶,接种到培养基上,每瓶接5~7段。

3 培养

将顶芽或茎段,接种在MS + 0.5mg/L BA + 0. lmg/L NAA + 0. lmg/L GA培养基中培养,附加3%蔗糖,用0.5%琼脂固化。在温度25℃左右和光照下,5d后长出单生芽,4周后小芽长到1 cm并产生丛生苗。

将丛生苗分割接种在MS + 2mg/L BA + 0.5mg/L GA培养基中,附加蔗糖3% ,0.5%琼脂固化。

经培养小苗长到3~5cm高时,可以从节间处,将其切成小段进行继代培养,侧芽萌动,迅速生长。1个月可长到3~5cm高,继代培养可使侧芽苗不断增殖,从而获得大量可供繁殖的试管苗。

4.切下带顶芽的苗,插在1/2MS+1mg/L GA + 2%蔗糖的培养基上培养。约4、5周后,在自然光照下,生根发育成完整植株,供移栽。

MS(Murashige & Skoog)培养基是目前普遍使用的培养基。它有较高的无机盐浓度,对保证组织生长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十分有利。MS固体培养基可用来诱导愈伤组织,或用于胚、茎段、茎尖及花药培养,它的液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显成功。

B5培养基的主要特点是含有较低的铵,这是因为铵可能对不少培养物的生长有抑制作用。有些植物的愈伤组织和悬浮培养物在MS培养基上生长得比B5培养基上要好,而另一些植物,在B5培养基上更适宜。 N6培养基特别适合于禾谷类植物的花药和花粉培养。 怀特(While)培养基由于无机盐的数量比较低,更适合木本植物的组织培养。

分享到
声明:本文为用户投稿或编译自英文资料,不代表本站观点和立场,转载时请务必注明文章作者和来源,不尊重原创的行为将受到本站的追责;转载稿件或作者投稿可能会经编辑修改或者补充,有异议可投诉至本站。

热文导读