食品卫生微生物学检验.大肠菌数测定
1、微生物 大肠菌群的检测GB4783-2010 第一法 大肠菌群MPN计数法 第二法 大肠菌群平板计数法 1月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤：称取36g溶于1000ml蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，分装于有倒立发酵管的试管中，每管10ml，121℃高压灭菌15min后备用。双料除蒸馏水外其他成分加倍。
2、食品中大肠菌群的测定：MPN法、平板计数法。食品中大肠菌群的测定方法：MPN法：按照GB 4783-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》进行。该方法的结果单位为MPN/g（mL）。平板计数法：按照GB 4783-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》进行。
3、食品卫生微生物学检验 大肠菌群计数是食品安全检测中的重要环节。其标准名称“食品卫生微生物学检验 大肠菌群计数”（StandardTitle in Chinese）明确指出，这项检验主要针对大肠菌群的计数，以评估食品的卫生状态，确保公众健康。
4、本标准代替GB4783—2010《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》、GB/T47832—2002《食品卫生微生物学检验 大肠菌群的快速检测》和SN/T0169—2010《进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法》大肠菌群计数部分。
食品中的大肠杆菌的检测方法
1、气相色谱（GC）：此方法首先对大肠杆菌进行衍生化前处理，以便进一步分析。通过顶空气相色谱法，利用食品顶部微生物代谢产物CO2进行分析，以评估污染程度。与传统技术相比，气相色谱法检测速度快，灵敏度高，对食品质量安全检测具有重要意义。
2、大肠菌数指数定义：大肠菌数指数是指每升水中大肠菌群的数目，其检测方法是采用乳糖发酵法。 中国卫生标准：根据规定，每1000毫升饮用水中大肠菌群的数目不得超过3个。对于瓶装汽水和果汁，每100毫升中的大肠菌群数目不能超过5个。
3、大肠菌数指数：指每立升中大肠菌群数，采用乳糖发酵法检测。中国的卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群；瓶装汽水、果汁等每100ml大肠菌群不得超过5个。全自动微生物定量分析仪（TEMPO）检测 全自动微生物定量分析（TEMPO）仪的大肠杆菌群计数检测有TC和CC两种方法。
4、国家标准采用三步骤进行：首先，进行乳糖发酵试验，将样品稀释后接种乳糖胆盐发酵管，36±1℃培养48±2小时，观察是否有气体生成。接着，将产气样本转移至伊红美蓝琼脂平板上培养，观察菌落形态。
5、细菌培养法：这是检测大肠杆菌的经典方法。通过采集样本，如水样、食品样或人体排泄物等，然后在特定的培养基上进行细菌培养。大肠杆菌在此类培养基上会生长并形成菌落，从而可以观察和计数。 分子生物学技术：随着生物技术的发展，PCR等分子生物学技术被广泛用于大肠杆菌的检测。
6、大肠杆菌检测过程：在装有9mL生理盐水的无菌试管上做好标记，用1mL无菌吸管吸取1：10样品匀液1mL。沿管壁缓缓注入装有9mL生理盐水的无菌试管中，稀释前后试管口都应在酒精灯上灼烧片刻。加塞后于振荡器上混合均匀，制成1：100的样品匀液。同理，按上述操作，依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。
食品中大肠杆菌的检测
法律分析：大肠菌数指数：指每立升中大肠菌群数，采用乳糖发酵法检测。 中国卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群，瓶装汽水和果汁中每100ml大肠菌群不能超过5个。法律依据：《中华人民共和国食品安全法》 第四条 食品生产经营者对其生产经营食品的安全负责。
气相色谱（GC）：此方法首先对大肠杆菌进行衍生化前处理，以便进一步分析。通过顶空气相色谱法，利用食品顶部微生物代谢产物CO2进行分析，以评估污染程度。与传统技术相比，气相色谱法检测速度快，灵敏度高，对食品质量安全检测具有重要意义。
细菌总数：检测每毫升或每克样品中所含细菌数，采用倾注培养计算。中国规定的卫生标准是每毫升饮水中细菌总数不得超过100个。大肠菌数指数：指每立升中大肠菌群数，采用乳糖发酵法检测。中国的卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群；瓶装汽水、果汁等每100ml大肠菌群不得超过5个。
检测食品中大肠杆菌的样子是：大肠菌群是一群在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。其主要检测意义在于反映食品卫生状况并推测其存在肠道致病菌的可能性。常以大肠菌群作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。
GB4783—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》第一法：大肠菌群MPN计数法。第二法：大肠菌群平板计数法。两种方法适用于各类食品中大肠菌群的计数。
证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。SN0169-92《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法》规定操作：推测试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管LST肉汤。
检验食品中的大肠菌群需要注意的实验步骤有哪些?
食品中大肠菌群检验的实验步骤如下： 准备试剂和仪器：包括煌绿乳糖胆盐肉汤、结晶紫中性红胆盐琼脂、恒温培养箱、自动稀释仪、均质器和振荡器等。 样品处理：对于固体样品，应在无菌条件下充分粉碎。以乳粉为例，取密封状态良好的试样，备用待测。
进入无菌操作室前应更换无菌实验服，戴帽子、口罩、无菌手套。进入无菌操作室后，首先用镊子夹取适量酒精棉全面擦拭双手，然后才能进行实验操作。酒精易燃，因此在擦拭双手的过程中应离开酒精灯火焰一定距离，防止出现危险，待手上的酒精挥发完全后，再进行实验操作。
推测试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管LST肉汤。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。证实试验：将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管中，36±1℃培养48±2h，观察是否产气。以BGLB产气为阳性。查MPN表，报告每ml（g）样品中大肠菌群的MPN值。
细菌总数：检测每毫升或每克样品中所含细菌数，采用倾注培养计算。中国规定的卫生标准是每毫升饮水中细菌总数不得超过100个。大肠菌数指数：指每立升中大肠菌群数，采用乳糖发酵法检测。中国的卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群；瓶装汽水、果汁等每100ml大肠菌群不得超过5个。
- 根据食品卫生标准或样品污染程度，选择三个稀释度，每个稀释度接种3管。 乳糖发酵试验 将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管中，每管接种量超过1ml的用双料乳糖胆盐发酵管。每个稀释度接种3管，于36±1度温箱中培养24±2小时。若所有管不产气，可报告为大肠菌群阴性；如有产气，则继续下一步。
大肠菌群检测是一个严谨的实验室操作，首先，进入无菌室需要进行一系列的消毒程序。步骤如下：打开紫外灯灭菌0.5-1小时，待灯熄灭0.5小时后方可进入。在更衣间更换专用装备后，进行手部消毒，使用75%酒精棉签。实验步骤主要包括准备样本和培养基。
食品中大肠菌群的测定
1、食品中大肠菌群的测定：MPN法、平板计数法。食品中大肠菌群的测定方法：MPN法：按照GB 4783-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》进行。该方法的结果单位为MPN/g（mL）。平板计数法：按照GB 4783-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》进行。
2、无菌 1 mol/L HCl：移取浓盐酸90 mL，用蒸馏水稀释至1 000 mL，121 ℃高压灭菌15 min。
3、GB 4783—2010《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》第一法：大肠菌群MPN 计数法。第二法：大肠菌群平板计数法。两种方法适用于各类食品中大肠菌群的计数。
4、食品中大肠菌群检验的实验步骤如下： 准备试剂和仪器：包括煌绿乳糖胆盐肉汤、结晶紫中性红胆盐琼脂、恒温培养箱、自动稀释仪、均质器和振荡器等。 样品处理：对于固体样品，应在无菌条件下充分粉碎。以乳粉为例，取密封状态良好的试样，备用待测。
5、食品微生物学检验 大肠菌群计数：大肠菌群平板计数法（GB 4783-2010）一 试剂和仪器 煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB肉汤）结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）恒温培养箱 自动稀释仪 均质器 振荡器 二 样品处理 固体样品应在无菌条件下充分粉碎。本次演示以乳粉为例，取密封状态良好的试样，备用待测。
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我是易学品鉴的签约作者“归零”！
希望本篇文章《食品中是怎样进行大肠菌群测定的实验》能对你有所帮助！
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本文概览：食品卫生微生物学检验.大肠菌数测定 1、微生物 大肠菌群的检测GB4783-2010 第一法 大肠菌群MPN计数法 第二法 大肠菌群平板计数法 1月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST...